紫外光譜是紫外分光光度計等分析化學中的重要工具。UV（紫外線）光譜的另一個名稱是電子光譜，因為它涉及將電子從基態(tài)提升到更高的能量或激發(fā)態(tài)。在本文中，我將解釋紫外光譜的基本原理、工作原理和所有應用。

一、紫外光譜簡介
紫外光譜是一種吸收光譜，其中紫外線區(qū)域（200-400 nm）的光被分子吸收。紫外輻射的吸收導致電子從基態(tài)激發(fā)到更高能態(tài)。被吸收的紫外線輻射的能量等于基態(tài)和高能態(tài)之間的能量差（deltaE = hf）。
   通常，有利的躍遷是從MAX占據(jù)分子軌道 (HOMO) 到LOW未占據(jù)分子軌道 (LUMO)。對于大多數(shù)分子來說，LOW能量占據(jù)的分子軌道是s 軌道，對應于 sigma 鍵。p 軌道處于較高的能級，具有未共享電子對的軌道（非鍵軌道）位于較高的能級。未占軌道或反鍵軌道（pie *和sigma *）是能量High的占據(jù)軌道。
在所有化合物（除了烷烴）中，電子都會經(jīng)歷各種躍遷。一些隨著能量增加的重要轉變是：非鍵到派*，非鍵到 sigma *，派到派*, sigma 到 pie *和 sigma 到 sigma *。

二、紫外光譜學原理

紫外光譜遵循比爾-朗伯定律，該定律指出：當一束單色光通過吸收物質的溶液時，輻射強度隨吸收溶液厚度的下降率與入射輻射成正比：以及溶液的濃度。
Beer-Lambert 定律的表達式為 - A = log (I 0 /I) = Ecl
其中，A = 吸光度 ，I 0 = 入射到樣品池，

目的光強度 I = 離開樣品池的光強度C = 溶質L
目 的摩爾濃度= 樣品池長度 (cm.)  ，E = 摩爾吸光率
從比爾-朗伯定律可以清楚地看出，能夠吸收給定波長的光的分子數(shù)量越多，光吸收的程度就越大。這是紫外光譜的基本原理。

三、紫外光譜的儀器和工作

可以同時研究紫外光譜儀的儀器和工作。大多數(shù)現(xiàn)代紫外光譜儀由以下部分組成 ：
光源：鎢絲燈和氫氘燈是廣泛使用的光源，因為它們覆蓋了整個紫外區(qū)域。鎢絲燈富含紅色輻射；具體地說，它們發(fā)出 375 nm 的輻射，而氫氘燈的強度低于 375 nm。
單色器：單色器通常由棱鏡和狹縫組成。大多數(shù)分光光度計是雙光束分光光度計. 從主光源發(fā)出的輻射在旋轉棱鏡的幫助下被分散。由棱鏡分離的光源的各種波長然后由狹縫選擇，這樣棱鏡的旋轉導致一系列連續(xù)增加的波長通過狹縫用于記錄目的。狹縫選擇的光束是單色的，并在另一個棱鏡的幫助下進一步分成兩束。
樣品和參比池：兩個分開的光束中的一個穿過樣品溶液，第二個光束穿過參比溶液。樣品和參考溶液都包含在細胞中。這些電池由二氧化硅或石英制成。玻璃不能用于電池，因為它也會吸收紫外線區(qū)域的光。
探測器: 通常兩個光電池用作紫外光譜中的檢測器。其中一個光電管接收來自樣品池的光束，第二個檢測器接收來自參考的光束。來自參比池的輻射強度比樣品池的光束強。這導致在光電池中產生脈動或交流電流。
放大器:光電管中產生的交流電被傳輸?shù)椒糯笃鳌７糯笃黢詈系揭粋€小型伺服計。一般來說，光電管產生的電流強度很低，放大器的主要目的是將信號放大多次，以便獲得清晰可記錄的信號。
錄音設備:大多數(shù)時間放大器都連接到連接到計算機的筆式記錄器。計算機存儲所有生成的數(shù)據(jù)并生成所需化合物的光譜。

四、紫外光譜中生色團和輔助色素的概念
發(fā)色團：發(fā)色團定義為在紫外或可見光區(qū)域 (200-800 nm)中顯示出特征吸收的任何孤立的共價鍵合基團。生色團可分為兩組：
a) 生色團，其包含 p 電子并經(jīng)歷餅對餅*躍遷。乙烯和乙炔是此類發(fā)色團的例子。
b) 同時包含 p 和非鍵合電子的發(fā)色團。他們經(jīng)歷了兩種類型的轉變；pie to pie *和 nonbonding to pie *。羰基、腈、偶氮化合物、硝基化合物等都是屬于此類發(fā)色團。
輔助色素- 助色團可以定義為任何本身不充當發(fā)色團但其存在導致吸收帶向光譜的較長波長移動的基團。-OH、-OR、-NH 2、-NHR、-SH等屬于輔助變色基團。

五、紫外光譜中的吸收和強度變化

在紫外光譜中觀察到四種類型的位移：
a) 紅移效應:這種類型的位移也稱為紅移。紅移是一種效應，由于助色劑的存在或溶劑的變化，吸收MAX值向更長的波長移動。羰基化合物的非鍵合到派*轉變觀察到紅移或紅移。
b) 低色移——這種效應也稱為藍移。深向色移是一種吸收max值向較短波長移動的效應。通常它是由于去除共軛或改變溶劑的極性引起的。
c) 增色效果- 增色偏移是吸收max值增加的效果。在化合物中引入輔助色素通常會導致增色效果。
d) 減色效應- 增色效應定義為吸收max值強度降低的效果。由于引入了新基團，分子的幾何形狀發(fā)生了畸變，因此發(fā)生了增色效應。

六、紫外光譜的應用

1.官能團的檢測：紫外光譜用于檢測化合物中發(fā)色團的存在與否。該技術不適用于檢測復雜化合物中的發(fā)色團。特定波段的波段缺失可以被視為特定群體缺失的證據(jù)。如果化合物的光譜在 200 nm 以上是透明的，則表明不存在。
2. 共軛程度的檢測：可以借助紫外光譜檢測多烯中的共軛程度。隨著雙鍵的增加，吸收向更長的波長移動。如果多烯中的雙鍵增加了 8 個，那么當吸收進入可見區(qū)域時，人眼就可以看到多烯。
3. 未知化合物的鑒定：可以借助紫外光譜鑒定未知化合物。將未知化合物的光譜與參考化合物的光譜進行比較，如果兩個光譜一致，則確認未知物質的鑒定。
4. 幾何異構體構型的測定：觀察到順式烯烴的吸收波長與反式烯烴不同。當其中一種異構體由于空間位阻而具有非共面結構時，這兩種異構體可以相互區(qū)分。與反式異構體相比，順式異構體遭受變形并在較低波長處吸收。
5. 物質純度的測定：物質的純度也可以借助紫外光譜來測定。將樣品溶液的吸收與參考溶液的吸收進行比較。吸收強度可用于樣品物質純度的相對計算。

     蘇州阿爾法生物提供的核酸提取儀、紫外分光光度計、分光光度計、均質機、冷凍離心機、超速離心機等實驗室設備。