神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)較為常見(jiàn)的原發(fā)性惡性腫瘤。髓樣分化蛋白 2 (MD2) 作為 toll 樣受體 4 (TLR4) 的輔助受體介導(dǎo)先天免疫反應(yīng)。然而，MD2在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤進(jìn)展和免疫細(xì)胞浸潤(rùn)中的實(shí)際作用仍不清楚?？茖W(xué)研究曾在探討 MD2 是否可以通過(guò)介導(dǎo)膠質(zhì)瘤中的免疫細(xì)胞浸潤(rùn)成為獨(dú)立的預(yù)后因素。

實(shí)驗(yàn)方法

便攜式顯微鏡采用高清攝影系統(tǒng)成像圖片，并支持在線多人同步在線同屏閱片。

實(shí)驗(yàn)原理

使用CGGA、TCGA和Rembrandt數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行MD2的mRNA表達(dá)和DNA甲基化差異分析，并使用Kaplan-Meier繪圖儀進(jìn)行生存分析。應(yīng)用單變量和多變量Cox回歸分析MD2的預(yù)后價(jià)值，并構(gòu)建列線圖評(píng)估MD2的臨床價(jià)值。然后，利用基因本體論（GO）和京都基因和基因組百科全書(shū)（KEGG）分析MD2相關(guān)的信號(hào)通路。此外，通過(guò) TIMER 和 CIBERSOPT 計(jì)算 MD2 和免疫細(xì)胞浸潤(rùn)之間的相關(guān)性。MD2 表達(dá)與巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)之間的相關(guān)性通過(guò)使用膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的小干擾 RNA (siRNA) 敲低 MD2 表達(dá)來(lái)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

圖 1MD2 膠體表達(dá)來(lái)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證圖

結(jié)果分析(Result analysis):

 研究發(fā)現(xiàn) MD2 過(guò)度表達(dá)并與膠質(zhì)瘤預(yù)后不良有關(guān)。同時(shí)，MD2的高表達(dá)可能是膠質(zhì)瘤中MD2基因DNA甲基化程度較低的結(jié)果。此外，單變量和多變量 Cox 回歸分析表明，MD2 可能是膠質(zhì)瘤的獨(dú)立預(yù)后因素。進(jìn)一步的功能富集分析表明，MD2的功能與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。此外，MD2的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞和腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞的促腫瘤表型的浸潤(rùn)和極化密切相關(guān)。

結(jié)論 (Result): 

     結(jié)論：這些發(fā)現(xiàn)提供了強(qiáng)有力的證據(jù)，表明 MD2 可以作為一種有價(jià)值的免疫相關(guān)生物標(biāo)志物來(lái)診斷和預(yù)測(cè)膠質(zhì)瘤的進(jìn)展。

      這些結(jié)果在CGGA數(shù)據(jù)庫(kù)和醫(yī)學(xué)機(jī)構(gòu)中得到驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，采集并制作組織樣本的免疫組化（IHC方法）切片，使用Ocus切片掃描顯微成像系統(tǒng)（芬蘭Grundium）進(jìn)行數(shù)字化掃描和圖像保存及導(dǎo)出，而后并根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估分級(jí)（圖2）

                                         (圖 2)

膠質(zhì)瘤中 MD2 的表達(dá)和生存分析。CGGA (A) 、TCGA (B)和Rembrandt (C)數(shù)據(jù)庫(kù)中膠質(zhì)瘤患者M(jìn)D2 的 mRNA表達(dá)差異分析。CGGA (D)、TCGA (E)和 Rembrandt (F) 數(shù)據(jù)庫(kù)中 MD2 表達(dá)與神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者總體存活率關(guān)聯(lián)的 Kaplan-Meier  存活圖。

組織染色切片進(jìn)行數(shù)字化掃描

 使用 Ocus切片掃描顯微成像系統(tǒng)（芬蘭Grundium）又對(duì)MYD88表達(dá)的組織染色切片進(jìn)行數(shù)字化掃描和圖像保存及導(dǎo)出，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估分級(jí)。

圖 4 組織切片掃描顯微鏡掃描圖

 文章結(jié)尾得出結(jié)論，MYD88對(duì)TIICs異常以及M2型巨噬細(xì)胞影響的神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者，具有預(yù)后評(píng)估價(jià)值。

   在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的攜式數(shù)字病理掃描顯微鏡采用了智能云技術(shù)，用戶可在任何有網(wǎng)絡(luò)的地方遠(yuǎn)程控制和訪問(wèn)其內(nèi)部的高清圖片，并支持多人實(shí)時(shí)同屏閱片。便攜式顯微鏡由于體積小巧，可裝入個(gè)人行李箱中，并支持移動(dòng)充電；另外便攜式顯微鏡具備*的內(nèi)嵌式電腦，不需外配服務(wù)器和電腦，可通過(guò)移動(dòng)終端（手機(jī)、平板、筆記本電腦）的網(wǎng)頁(yè)瀏覽器在地球上任何有網(wǎng)絡(luò)的地方進(jìn)行遠(yuǎn)程數(shù)據(jù)訪問(wèn)和高清圖片共享。

便攜式數(shù)字掃描顯微鏡的生物應(yīng)用領(lǐng)域：

• 病理學(xué)（冷凍切片、組織學(xué)等）

• 臨床研究

• 獸醫(yī)病理學(xué)

• 人工智能診斷

• 海洋科學(xué)

• 地質(zhì)學(xué)

• 材料學(xué)