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熒光定量PCR出現(xiàn)CT值異常怎么辦？

熒光定量PCR是生物醫(yī)學(xué)中常用的檢測(cè)核酸病毒的方法之一，由此，這幾年P(guān)CR儀也成了近幾年臨床檢測(cè)和分子生物學(xué)研究的重要實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。我們知道CT值是PCR擴(kuò)增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴(kuò)增存在什么關(guān)系？為什么有的時(shí)候基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)（Fluorescencesignal）達(dá)到設(shè)定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時(shí)的所對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)（Cy...

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梅特勒ME204天平校準(zhǔn)方法

梅特勒天平ME204系列是實(shí)驗(yàn)室電子天平中常用的型號(hào)，天平使用時(shí)間久后，需要經(jīng)常進(jìn)行校準(zhǔn)和維護(hù)操作，除了定期檢定外，平時(shí)我們也可以自己進(jìn)行校準(zhǔn)，下面就自行校準(zhǔn)操作方法做以說(shuō)明。電子天平校準(zhǔn)步驟由于梅特勒ME204系列電子天平無(wú)自校準(zhǔn)功能需要進(jìn)行人工校準(zhǔn)調(diào)試，在校準(zhǔn)前需要確保周圍環(huán)境穩(wěn)定，比如空氣流通速度，室溫、環(huán)境濕度等等，都會(huì)對(duì)天平校準(zhǔn)準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。在校準(zhǔn)過(guò)程中應(yīng)充分的考慮環(huán)境因素和人為操作因素。校準(zhǔn)時(shí)，在開機(jī)后直接按”CAL”鍵，Z這時(shí)天平上會(huì)自動(dòng)顯示對(duì)應(yīng)的砝碼標(biāo)值。根...

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生物發(fā)酵罐取樣時(shí)的注意事項(xiàng)

生物發(fā)酵罐在微生物發(fā)酵、細(xì)胞培養(yǎng)、生物制藥等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。發(fā)酵罐內(nèi)的樣品取樣，培養(yǎng)基補(bǔ)料、移液接種等操作也是生產(chǎn)試驗(yàn)過(guò)程中的重要環(huán)節(jié)。生物發(fā)酵罐的取樣方法：一、生物培養(yǎng)過(guò)程為什么要進(jìn)行取樣操作？利用生物培養(yǎng)過(guò)程是個(gè)復(fù)雜的反應(yīng)過(guò)程，需要定時(shí)取樣監(jiān)測(cè)反應(yīng)器內(nèi)部?jī)?nèi)容的狀態(tài)及指標(biāo)。比如細(xì)胞濃度，CO2通氣度，細(xì)胞液粘度，產(chǎn)物濃度等都要取樣分析，以調(diào)整培養(yǎng)參數(shù)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)樣品的取樣檢測(cè)可以提前測(cè)試培養(yǎng)物對(duì)下游工程的影響，比如酵母菌的分離與提純。通過(guò)定時(shí)取樣不僅可以制作對(duì)比樣品可用來(lái)驗(yàn)證實(shí)...

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細(xì)胞生物反應(yīng)器中影響細(xì)胞培養(yǎng)的參數(shù)有哪些

小規(guī)模的動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)一般是在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行，如需大規(guī)模培養(yǎng)則需要通過(guò)生物反應(yīng)器逐級(jí)放大。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)方式主要有兩種即：貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)，動(dòng)物活體體細(xì)胞當(dāng)離體置于體外培養(yǎng)時(shí)多數(shù)是以貼壁方式進(jìn)行生長(zhǎng)，比如：纖維細(xì)胞，骨細(xì)胞，肌肉細(xì)胞，肝臟細(xì)胞，膠質(zhì)細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等。也有少數(shù)體細(xì)胞在體外的生長(zhǎng)方式是懸浮生長(zhǎng)的，比如：血紅細(xì)胞，白細(xì)胞，脾臟細(xì)胞，骨髓干細(xì)胞，癌腫細(xì)胞等。動(dòng)物細(xì)胞放大培養(yǎng)所選擇的反應(yīng)器參數(shù)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)很重要，下面以搏旅發(fā)酵罐BioCoreQC系列臺(tái)式...

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細(xì)胞培養(yǎng)工藝中生物反應(yīng)器攪拌槳的選擇

細(xì)胞生物反應(yīng)器種類繁多，功用不一，但實(shí)驗(yàn)室里目前使用較多的還是攪拌式生物反應(yīng)器，大容量的生物反應(yīng)器多數(shù)采用不銹鋼材質(zhì)，這類反應(yīng)器主要應(yīng)用于中量試樣或大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。10L以下的則一般采用硅硼玻璃材質(zhì)。主要用于實(shí)驗(yàn)室少量樣品處理或種子細(xì)胞制備；攪拌式生物反應(yīng)器針對(duì)不同的培養(yǎng)細(xì)胞所搭配的攪拌槳也有所不同，攪拌叫主要可以分為以下四種：提升式攪拌槳，斜葉式攪拌槳，螺旋攪拌槳等。懸浮細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞、低密度微載體培養(yǎng)所用的攪拌槳由于具有較低的剪切力，所以多數(shù)采用提升式或斜葉式攪拌槳，對(duì)于...

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